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乙酰丁香酮的应用原理和配置方法
乙酰丁香酮的应用原理和配置方法
乙酰丁香酮是一种酚类化学物,可诱导脓杆菌Vir基因的活化,从而促进外源基因的整合。作用机理是通过诱导农杆菌Vir区基因的活化与表达,促进T-DNA的加工与转移,从而促使农杆菌T-DNA更容易进入植物基因组并与其整合。
乙酰丁香酮(AS)的作用原理,是其可诱导农杆菌Vir基因活化,从而促进外源基因的整合。所以最好让其有一定的诱导时间再转化,效果要好些,而不是加完后直接转化(需要活化)
乙酰丁香酮的配制方法:
1、用于拟南芥花侵染的,配制使用的溶剂为DMSO,母液为100mM,使用浓度请参照相关文献。
2、另外一种是用于愈伤组织的侵染,是用少量甲醇溶解后,再用蒸馏水定容。之后过滤除菌 。显然两者溶剂不一样,不过建议还是使用DMSO。
乙酰丁香酮使用方法:
一般使用终浓度为100-200 umol/L。可用DMSO溶解,配置1M母液,分装-20度保存。转化前,将乙酰丁香酮加入转化缓冲液,冰上放置约1 h后即可使用。
乙酰丁香酮贮存条件:密封室温保存