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HEPES特性、应用及注意事项
HEPES的缓冲特性
Hepes是一种两性离子磺酸缓冲液,它是Norman E. Good 在1966年描述的首批好的缓冲剂之一。
HEPES具有以下特征:
· pKa1 (25 °C) = 3
· pKa2 (25 °C) = 7.5
· 有效缓冲范围= 2.5至3.5或6.8至8.2
大多数细胞的最佳培养环境为pH 7.2-pH 7.4,HEPES的缓冲范围正好落在pH 6.8-pH 8.2,有利于细胞培养。
HEPES的应用
· 细胞和组织培养
· 蛋白质纯化与提取
· 免疫沉淀
· 细胞裂解
· HEPES具有可忽略的金属离子结合,所以成为可能被金属螯合抑制的酶的缓冲剂的良好选择
注意事项
· 不适用于氧化还原研究
· 它影响神经元细胞的膜电位
· 干扰过氧化物酶对酚的氧化作用
· 它非常易溶于水
· 它与金属离子的结合微乎其微
· 尽量将含有HEPES的溶液置于黑暗中,以防止氧化