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HEPES缓冲液配制方法
HEPES溶液:一种弱酸,中文名字是4-羟乙基哌嗪乙磺酸。用作生物缓冲试剂,可配制蛋白提取缓冲液、细胞培养用缓冲液等。pH范围6.8-8.2。
关于 HEPES 缓冲溶液的配制, 不同的文献资料有不同的说法。 根据用途, 一种是单纯的 HEPES+NaOH, 另一种是 HEPES+盐。各种配制方法总结如下:
一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution 的配制
119.15 g HEPES 溶解在 400ml 蒸馏水中,加 0.5~1M的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES 的有效 pH 范围是 6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至 500ml,于 4 摄氏度保存。
二、加少量盐的 HEPES Buffer 配方(500ml)
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4·7H2O 0.198g,用 0.5M NaOH 水溶液调节pH值,最后定容。
三、2×HEPES 缓冲盐溶液的配制
将 1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4·2H2O、0.2g 葡聚糖(glucan or dextran)和 1g HEPES 溶 解在 90ml 的蒸馏水,用 0.5M NaOH 调节至所需 pH 值,再用蒸馏水定容至 100ml 即可。