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链霉亲和素(SA)的分离纯化方法

发布时间:2020-3-9 访问人数: 31

根据文献报道,链霉亲和素SA的分离纯化有两种方法:

(1)经典方法包括硫酸铵沉淀、离子交换层析、结晶等流程。由于硫酸铵使培养液中的SA和内源性蛋白酶被共同浓缩、沉淀,因此蛋白酶作用加强,结果使SA分子降解,最后分离到的SA 分子量为60kD 左右,许多作为商品的核心SA就是将其进步处理后得到。

(2)亲和层析法,使用2-亚氨基生物素琼脂糖凝胶4B亲和柱,其与SA的亲和力随pH的下降而减弱,在pH 10~ 11范围内,两者紧密结合,当pH降至4时, SA即被解离下来,由于在pH 4~ 11范围SA活性不受影响,因此分离纯化SA效果良好。使用这方法可直接从培养液中分离SA,因此省略了沉淀、浓缩等步骤,从而减弱了内源性蛋白酶的作用。

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