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异硫氰酸胍常用的方法

发布时间:2020-3-11 访问人数: 137

异硫氰酸胍(GITC)CAS593-84-0是一种超亲性试剂,常用的蛋白质变性剂,但最常用于DNARNA的提取。

常用的方法是硫氰酸盐-苯酚-氯仿萃取法。如果提取RNA用于Northern blotting 或提取DNA用于 Southern blot analysis,则不必严格使用苯酚或氯仿,因为凝胶电泳后转移到膜上将RNA/DNA从蛋白质中分离出来。此外,由于这些方法使用探针与它们的偶联物结合,因此,通过这一过程的肽通常不重要,除非肽是RNaseDNase,而且只有在该酶设法重新生成时才重要,如果遵循适当的协议,就不应该发生这种情况。一个可能的例外可能是在处理温度极端微生物时,因为这些微生物的一些酶在特殊情况下可以保持稳定。

异硫氰酸胍还可用于RNADNA提取中的细胞和病毒颗粒的裂解,其功能除了裂解作用外,还可通过使RNA酶和DNase酶变性来阻止它们的活性。否则这些酶会破坏提取物。

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